
培養(yǎng)方法與步驟:
①動(dòng)物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開(kāi)腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí),待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁,并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好,可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色,此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞,這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱(chēng)
人扁桃體間質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
扁桃體組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
長(zhǎng)梭形
分類(lèi)
人原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1352
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1)細(xì)胞來(lái)源于人正常扁桃體組織。
2)細(xì)胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:長(zhǎng)梭形,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
扁桃體是一對(duì)扁卵圓形的器官,位于扁桃體窩內(nèi)。按其位置分別稱(chēng)為腭扁桃體、咽扁桃體和舌扁桃體。其中,腭扁桃體大,通常所說(shuō)的扁桃體即為腭扁桃體。間質(zhì)細(xì)胞是扁桃體內(nèi)那些輔助實(shí)質(zhì)細(xì)胞完成氣管功能的細(xì)胞,主要起到支持和保護(hù)的作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
細(xì)胞PAR-1蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒
小鼠腫瘤蛋白p53(TP53)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)elisa檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞鎂離子濃度化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒
山羊白介素2受體(IL-2R)elisa分析檢測(cè)試劑盒
分選連接蛋白11抗體 Anti-SNX11
核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體 Anti-RelB
NADH脫氫酶黃素蛋白1抗體 Anti-NDUFV1
細(xì)胞凋亡調(diào)控蛋白ZDHHC16抗體 Anti-ZDHHC16
細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD1 + SMAD5抗體 SMAD1 + SMAD5
限局性核因子3抗體 NLF3
α-甲基?;o酶A消旋酶單克隆抗體 AMACR
δ連環(huán)蛋白重組兔單克隆抗體 delta 1 Catenin
ATP依賴(lài)解旋酶DDX24抗體 DDX24
B細(xì)胞連接蛋白抗體 BLNK
辣椒素受體5抗體 TRPV5
鏈酶親和素抗體 Streptavidin
中胚層特異性轉(zhuǎn)錄源蛋白MEST抗體 MEST
腫瘤抑制基因LATS2抗體 LATS2
干擾素α21抗體 IFNA21
孤兒核受體蛋白Nur77抗體 Nur77
KMT2H蛋白抗體 ASH1L
MAP7D2蛋白抗體 MAP7D2
染色質(zhì)組裝因子1P155抗體 p150 CAF1
乳鐵蛋白單克隆抗體 Lactoferrin
人白介素12受體亞基β-1(IL12RB1/IL12R/IL12RB)elisa檢測(cè)試劑盒
人扁桃體間質(zhì)細(xì)胞Chicken IgM / RBITC
人類(lèi)皰疹病毒8 ORF62抗體
E3 ubiquitin protein ligase UBR2; N recognin 2; Ubiquitin ligase E3 alpha II; Ubiquitin protein ligase E3 alpha 2; Ubiquitin protein ligase E3 component n recognin 2; UBR 2; UBR2_HUMAN; N-recognin-2; Ubiquitin-protein ligase E3-alpha-2; Ubiquitin-protein ligase E3-alpha-II.
人扁桃體間質(zhì)細(xì)胞
人尾椎腫瘤細(xì)胞
MDA-MB-435(乳腺癌細(xì)胞)
NB16人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無(wú)菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。