培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人膽囊微血管內(nèi)皮細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
膽囊組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
上皮樣 多角形細胞
分類
人原代細胞
貨號
A01X1307
用途
僅供科研實驗
細胞特性：
1）細胞來源于人正常膽囊組織。
2)細胞鑒定：vWF熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式：上皮樣，多角形細胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代內(nèi)皮細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介：
膽囊，是位于右方肋骨下肝臟后方的梨形囊袋構(gòu)造，有濃縮和儲存膽汁之作用。膽囊壁由粘膜、肌層和外膜三層組成。微血管作為分布廣的血管。它是連接微動脈和微靜脈的血管。它們分支并互相吻合成網(wǎng)。管壁薄，通透性強。其功能是利于血液與組織之間進行物質(zhì)交換。微血管管壁主要由一層內(nèi)皮細胞和基膜組成。細的橫切面由一個內(nèi)皮細胞圍成。
公司正在出售的產(chǎn)品：
beta;acid(includesglucosylceramidase)(GBA)ELISAkit
大鼠成纖維細胞生長因子8(FGF8)elisa分析檢測試劑盒
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人甲狀腺球蛋白(TG)elisa分析檢測試劑盒
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L選擇素抗體 Anti-L-Selectin/CD62L
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N-乙酰轉(zhuǎn)移酶8B抗體 Anti-NAT8B
鋅指蛋白340抗體 Anti-ZBTB46/ZNF340/BTBD4
植物環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa分析檢測試劑盒
cGMP ELISA Kit
人促卵泡素(FSH)elisa分析檢測試劑盒
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谷氨酰胺酶（GLS)測試盒
人體c-Ki-ras RFLP基因分析試劑盒
小鼠成纖維細胞生長因子8(FGF8)elisa分析檢測試劑盒
大鼠CD44分子(CD44)elisa分析檢測試劑盒
蛋白激酶錨定蛋白樣蛋白2抗體
NBEAL2
FMO9P蛋白抗體
FMO9P
Ten-eleven轉(zhuǎn)運基因1蛋白抗體 Anti-TET1/CXXC6
核糖體S6蛋白激酶β2抗體 Anti-p70 S6 Kinase Beta 2/P70 Beta 2
OS-9蛋白抗體 Anti-OS9
磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 Anti-phospho-SHC(Tyr239/240)
Cy7標(biāo)記的兔抗牛IgM
人膽囊微血管內(nèi)皮細胞ACTN-1 ELISA Kit
人含球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域激酶1(Tie-1)elisa分析檢測試劑盒
AMAP 1; AMAP1; AMAP-1; ARF GTPase activating protein 1; ASAP 1; Centaurin beta 4; CentB4; DDEF 1; DDEF1 protein; PAG 2; PAG2; PAG-2; PAP; PIP2 dependent ARF1 GAP; ZG 14P; ZG14P; Development and differentiation enhancing factor 1; 130 kDa phosphatidylinositol 4 5 biphosphate dependent ARF1 GTPase activating protein; ADP ribosylation factor directed GTPase activating protein 1; ASAP1_HUMAN.
人膽囊微血管內(nèi)皮細胞
人胎盤間充質(zhì)干細胞
HEK-293（人胚腎細胞）
NCI-H1437人肺癌細胞
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。