
培養(yǎng)方法與步驟:
①動(dòng)物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí),待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人肺動(dòng)脈高壓血管內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
肺動(dòng)脈組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
上皮樣 多角形細(xì)胞
分類
人原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1261
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1)組織來源于肺動(dòng)脈高壓患者術(shù)后的肺動(dòng)脈組織。
2)細(xì)胞鑒定:CD31或血管假性血友病因子(vWF)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,多角形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
肺動(dòng)脈高壓是患者遠(yuǎn)端肺小動(dòng)脈通常出現(xiàn)特征性的病理搞不,主要包括血管內(nèi)膜增生并纖維化、叢樣病變、中膜增生肥厚、肌化及血栓的形成。肺小動(dòng)脈的這種持續(xù)性病理改變終將導(dǎo)致以血管管腔逐漸閉塞為基本特征的惡性肺動(dòng)脈血管病變。長期進(jìn)行性的肺動(dòng)脈壓升高將會(huì)導(dǎo)致右心功能衰竭。
公司正在出售的產(chǎn)品:
SODELISAKit
植物茄呢醇磷酸酶2,葉綠體(SPS2/SPPS)elisa分析檢測試劑盒
chloroplastic(SPS2/SPPS)ELISA kit
人促胃液素受體(GsaR)elisa分析檢測試劑盒
HumanGsaRELISAKit
分選連接蛋白7抗體 Anti-SNX7
環(huán)指蛋白148抗體 Anti-RNF148
NFAM1抗體 Anti-NFAM1/CNAIP
鋅指脂蛋白-1c抗體 Anti-ZNF268
KIAA0427蛋白抗體
KIAA0427
含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族17抗體
ASB17
人elisa檢測試劑盒
總巰基含量比色法定量檢測試劑盒
人體胚胎干細(xì)胞條件培養(yǎng)基
大鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)elisa檢測試劑盒
RRP1B蛋白抗體
RRP1B
乙醇胺激酶α抗體
Choline kinase alpha
硫酸酯酶2蛋白抗體 Anti-Sulfatase 2
棕櫚酰蛋白水解酶2抗體 Anti-PPT2
妊娠相關(guān)血漿蛋白A2抗體 Anti-PAPP A2
結(jié)腸癌抗原16抗體 Anti-UTP14A/SDCCAG16
中文名
人肺動(dòng)脈高壓血管內(nèi)皮細(xì)胞Rabbit Anti-Bovine IgM / Cy3
果蠅RhoGAP92B抗體
NR2C; N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C; Glutamate Receptor Ionotropic N Methyl D Aspartate 2C; GRIN2C; N Methly D Aspartate Receptor Channel Subunit Epsilon 3; N Methyl D Aspartate Receptor Subtype 2C; NR2C; NMDE3_HUMAN.
人肺動(dòng)脈高壓血管內(nèi)皮細(xì)胞
人輸卵管上皮細(xì)胞
hTERT-HPNE(人胰腺導(dǎo)管細(xì)胞)
NCI-H1581人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。