培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱(chēng)
人附睪平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
附睪組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
長(zhǎng)梭形
分類(lèi)
人原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1381
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）組織來(lái)源于人的正常附睪組織。
2)細(xì)胞鑒定：α-SMA熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：長(zhǎng)梭形，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
附睪是一個(gè)多數(shù)曲折、細(xì)小的管子構(gòu)成的器官，一面連接著輸精管，一面連接著睪丸的曲細(xì)精管。當(dāng)精子離開(kāi)睪丸時(shí)，就跑到附睪里，繼續(xù)生長(zhǎng)成熟。附睪管除貯存精子外還能分泌附睪液，其中含有某些、酶和特異的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，它們有助于精子的成熟。附睪管由黏膜、肌層和外膜組成。其中，肌層主要是由平滑肌細(xì)胞構(gòu)成。
公司正在出售的產(chǎn)品：
IL-8ELISAKit
魚(yú)(NE)elisa分析檢測(cè)試劑盒
NE ELISA kit
人層粘連蛋白亞基γ-2(LAMC2)elisa分析檢測(cè)試劑盒
HumanLAMC2ELISAKit
泛素樣蛋白Sumo3抗體 Anti-Sumo 3
環(huán)指蛋白167抗體 Anti-RNF167
造血蛋白1抗體 Anti-NCKAP1L/HEM1
鋅指蛋白ZBT10抗體 Anti-ZBT10
Kelch樣蛋白8抗體
KLHL8
細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白1/微管蛋白折疊輔助因子B抗體
CKAP1
蓬亂蛋白2抗體 Anti-shevelled 2
RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 Anti-RASSF6
跨膜受體蛋白Notch-2抗體 Anti-Notch 2
鋅指蛋白ZBTB39抗體 Anti-ZBTB39
腫瘤抑制基因PEPE1抗體
SASH1
附睪特異蛋白15抗體
LCN15
磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5b抗體 Anti-phospho-STAT5b(Ser731)
軸周蛋白PRX抗體 Anti-PRX/periaxin
成對(duì)樣源結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子2抗體 Anti-PITX2
髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子1抗體 Anti-TREML1/TLT1
兔抗人IgG（γ-鏈）恒定區(qū)抗血清
人附睪平滑肌細(xì)胞Rabbit Anti-Chicken IgM / Gold
多肽N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶1抗體
Spermatogenesis-associated protein 12; Spermatogenesis associated 12; Spermatogenesis-related protein 5; SPT12_HUMAN; SPATA12; SRG5; Testis Spermatogenesis Related Gene5.
人附睪平滑肌細(xì)胞
人視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞
人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞；SACC-83
NCI-h1688人經(jīng)典小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。