培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人肝門靜脈成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
術(shù)后肝門靜脈組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
長梭形細(xì)胞
分類
人原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1326
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）組織來源于人的術(shù)后肝門靜脈組織。
2)細(xì)胞鑒定：纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式：長梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf原代 成纖維 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介：
肝門靜脈是一種匯集，在肝門的入口處的一條大靜脈，兩端連接的都是一些。其作用是將小腸吸收的營養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)送到肝臟進(jìn)行，是由靜脈到靜脈的血管。
肝門靜脈的外膜由結(jié)締組織組成，結(jié)締組織主要由成纖維細(xì)胞構(gòu)成。
公司正在出售的產(chǎn)品：
氨待測樣品處理試劑盒
細(xì)胞環(huán)氧化酶（CYCLOOXYGENASE-2）活性比色法定量檢測試劑盒
人白介素23(IL-23)elisa分析檢測試劑盒
大鼠丙酮酸激酶M2型工酶(M2-PK)elisa分析檢測試劑盒
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)elisa檢測試劑盒
肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白4抗體 Anti-Senataxin/SETX
環(huán)指蛋白187抗體 Anti-RNF187
神經(jīng)肽W抗體 Anti-NPW/Neuropeptide W
鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8蛋白抗體 Anti-ZNT8
豬瘟病毒包膜糖蛋白E2抗體 CSFV E2
轉(zhuǎn)錄因子MEL1單克隆抗體 PRDM16
胱抑素9/半胱氨酸蛋白酶抑制劑9抗體 CST9
核黃素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 CT054
MYC啟動(dòng)子結(jié)合蛋白1抗體 ENO1
NOGO66受體相關(guān)蛋白2抗體 NgR2/RTN4RL2
溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族35成員F2抗體 SLC35F2
肽B/天蠶肽B抗體 Cecropin B
Cullin 4a蛋白抗體 Cullin 4A
DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 DNMT1
磷酸化氨基末端激酶2抗體 phospho-MAPK8 ( Thr183 + Tyr185)
磷酸化果糖-2,6-二磷酸酶3/磷酸果糖激酶2抗體 Phospho-PFKFB3/PFK2 (Ser467)
半乳糖凝集素12抗體 Galectin 12
丙型肝炎病毒-E2/NS1抗體 HCV E2/NS1 protein
線粒體核糖體蛋白L46抗體 MRPL46
鋅指蛋白232抗體 ZNF232
小鼠肌球蛋白重鏈2(MYH2)elisa檢測試劑盒
人肝門靜脈成纖維細(xì)胞Rat D-glyceraldehyde 3-phosphate ELISA Kit
人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)elisa分析檢測試劑盒
Alpha-s2-Casein; CSN1S2; CASA2_BOVIN; Casocidin-1; Casocidin-I.
人肝門靜脈成纖維細(xì)胞
人食管癌相關(guān)成纖維細(xì)胞
人Ph+急淋白血病細(xì)胞系;SUP-b15
NCI-H1755人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。