
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人宮頸平滑肌細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
長梭形
分類
人原代細胞
貨號
A01X1375
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)細胞來源于人正常組織。
2)細胞鑒定:α-SMA熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:長梭形,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代平滑肌細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
頸位于下部,近似圓錐體,長 2.5~75px,上端與體相連,下端深入。宮頸的大小與宮體比例隨年齡及狀態(tài)等而變化。宮頸壁由黏膜、肌層和外膜組成。其中,肌層是由平滑肌細胞構(gòu)成。
公司正在出售的產(chǎn)品:
AECAELISAKit
大鼠CC趨化因子受體9(CCR9)elisa分析檢測試劑盒
CCR9 ELISA Kit
人肝脂酶(HL)elisa分析檢測試劑盒
HLELISAKit
胞漿蛋白SH3GL3抗體 Anti-SH3GL3
環(huán)指蛋白215抗體 Anti-RNF215
神經(jīng)轉(zhuǎn)化酶2抗體 Anti-NEC2/Proprotein Convertase 2/PCSK2
鋅指蛋白916B抗體 Anti-ZBTB8B/ZNF916B
異質(zhì)核糖核蛋白C樣蛋白1抗體
hnRNP C-like-1
乙?;嚢彼?span>/乙?;嚢彼峥贵w
Acetylated Lysine
狗氨基乙酰丙酸,delta-脫水酶(ALAD)elisa分析檢測試劑盒
人體Caveolin-1 RFLP基因分析試劑盒
小鼠成纖維細胞生長因子11(FGF11)elisa檢測試劑盒
大鼠CD44分子(CD44)elisa檢測試劑盒免費代測
原鈣粘附蛋白β14抗體
PCDHB14
凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體
CARD8
TWIST蛋白抗體 Anti-TWIST protein
蛋白酶激活受體-1抗體 Anti-PAR-1/Thrombin receptor
磷酸化蛋白激酶A受體2α亞基抗體 Anti-phospho-PKA R2 (Ser96)
神經(jīng)細胞囊泡循環(huán)蛋白1抗體 Anti-Synaptogyrin 1
Cy5標(biāo)記的小鼠抗兔IgG H&L
人宮頸平滑肌細胞AHSG ELISA Kit
人過氧化脂質(zhì)(LPO)elisa分析檢測試劑盒
3230402J05Rik; 6030465J18Rik; Fkh19; Forkhead box N2; Forkhead box protein N2; Foxn1; foxn2; FOXN2_HUMAN; HTLF; Human T-cell leukemia virus enhancer factor.
人宮頸平滑肌細胞
人腎間質(zhì)成纖維細胞
人膀胱癌細胞;EJ-1 (STR)
NCI-H1944人肺癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。