細(xì)胞簡介：
滑膜是關(guān)節(jié)囊的內(nèi)層，淡紅色，平滑閃光，薄而柔潤，由疏松結(jié)締組織組成。關(guān)節(jié)腔內(nèi)的所有結(jié)構(gòu)，除關(guān)節(jié)軟骨、半月軟骨板以外 ,即便是通過關(guān)節(jié)腔的肌腱、韌帶等均全部為滑膜所包裹。
滑膜分泌滑液，在關(guān)節(jié)活動中起重要作用。正?；し譃閮蓪?，即薄的細(xì)胞層 (內(nèi)腔層)和血管層(內(nèi)膜下層)，是血管豐富的關(guān)節(jié)囊內(nèi)膜，貼附于非關(guān)節(jié)面部分，覆蓋于關(guān)節(jié)囊內(nèi)的骨面上，不在軟骨面上，此部分稱為邊緣區(qū)或裸區(qū)?；こ史奂t色，光滑發(fā)亮、濕而潤滑，有時可見絨毛，內(nèi)含膠原性纖維。
滑膜細(xì)胞有 A、B兩型。巨噬細(xì)胞樣A型細(xì)胞，表面有絲狀偽足、漿膜內(nèi)
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組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號 |
用途 |
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手術(shù)取得關(guān)節(jié)滑膜組織 |
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
A01X1411 |
僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞特性：
1）細(xì)胞來源于手術(shù)取得人正常關(guān)節(jié)滑膜組織。
2)細(xì)胞鑒定：纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式：成纖維樣細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)具體步驟：
（1）動物福利：小鼠麻醉犧牲/處死，或者斷頸處死；
（2）小鼠：可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min，然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈；
（3）取出心臟組織：用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔，取出心臟組織，置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中；
（4）組織：在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二，充分洗滌里邊的血液，/3次，每次5min；
（5）破碎組織：使用眼科鉗或者剪刀，將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊；（備注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min，
利于后期細(xì)胞從組織塊中爬出來，同時能夠消除部分結(jié)締組織等）
（6）種植組織塊：將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次，每次5min，然后使用完全培養(yǎng)基（含有1X雙抗）洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后，可以用細(xì)頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中（備注：破碎組織塊可能還含有液體，可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下，把液體）；種植完成后，可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時，然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜（也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜）；
（7）培養(yǎng)基培養(yǎng)：將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基，然后在恒溫潮濕細(xì)胞培養(yǎng)箱（37℃，5% CO2）培養(yǎng)48h后觀察單個細(xì)胞從組織塊中爬出情況，一般3-5 day能夠達(dá)到傳代的爬出效率；
（8）貼壁細(xì)胞傳代：當(dāng)單個細(xì)胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍，進(jìn)行傳代，此時可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細(xì)胞，消化時間根據(jù)正常細(xì)胞消化時間即可，當(dāng)然可以在消化過程中不斷管擦爬出細(xì)胞的皺縮情況，一旦達(dá)到消化完成（皺縮細(xì)胞≥70%）即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個細(xì)胞時候，一定要輕柔/緩慢，不能吹打到組織塊，如果組織塊掉下來，大概率是不會再貼壁成功啦。根據(jù)細(xì)胞數(shù)量種植到對應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中；
（9）鑒定：細(xì)胞在傳代至代、第五代、第十代時候可以將部分細(xì)胞進(jìn)行鑒定，鑒定辦法包括：RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細(xì)胞術(shù)等。實(shí)驗(yàn)方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。其中，機(jī)械分散法的特點(diǎn)是簡便、快速，但對組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差，適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人成纖維細(xì)胞生長因子23(FGF-23)elisa分析檢測試劑盒
猴分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)elisa分析檢測試劑盒
人體MMP9 RFLP基因分析試劑盒
小鼠成纖維細(xì)胞生長因子4(FGF4)elisa分析檢測試劑盒
大鼠CD30分子(CD30)elisa分析檢測試劑盒
閱讀障礙相關(guān)蛋白Shootin抗體 Anti-Shootin/KIAA1598
環(huán)指蛋白35抗體 Anti-RNF35
神經(jīng)特異性轉(zhuǎn)錄因子DPF1抗體 Anti-Neuro D4/DPF1
鋅指蛋白ZBTB5抗體 Anti-ZBTB5
纖維母細(xì)胞生長因子13抗體 FGF13
線粒體內(nèi)膜轉(zhuǎn)位源蛋白50抗體 TIMM50
γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子抗體 CXCL9
白介素17受體C抗體 IL17RC
BRD2蛋白抗體 BRD2
CD39樣蛋白1抗體 ENTPD2
離子型谷氨酸受體1抗體 NMDAR1
磷酸化Connexin 43蛋白抗體 Phospho-Connexin 43 (Ser368)
腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6抗體 TRAF6
軸索過度生長抑制因子受體/Nogo受體抗體 Nogo R
睪丸特異激酶2抗體 TESK2
骨形態(tài)發(fā)生蛋白2受體抗體 BMPR2
L-瓜氨酸抗體 L-Citrulline
MS4A15蛋白抗體 MS4A15
人瘤病毒16型E7抗體 HPV16 E7
神經(jīng)氨酸酶1抗體 NEU1/Neuraminidase
血液賴（lysine）含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒
人關(guān)節(jié)滑膜成纖維細(xì)胞Rabbit Anti-Human IgM / Gold
鋅指蛋白100抗體
RORG_HUMAN; Nuclear receptor ROR-gamma; ROR Gamma; NR1F3; RZRG; TOR; IMD42; RZR-GAMMA; Nuclear receptor RZR-gamma; Nuclear receptor subfamily 1 group F member 3; RAR-related orphan receptor C; Retinoid-related orphan receptor-gamma; ROR gamma T [Mus musculus]; nuclear receptor ROR-gamma isoform 2; RORgT;
人關(guān)節(jié)滑膜成纖維細(xì)胞
人少突膠質(zhì)細(xì)胞
人紅系白血病細(xì)胞；TF-1 (STR)
NCI-H2009人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞