培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱(chēng)
人結(jié)腸間質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
結(jié)腸組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
梭形細(xì)胞
分類(lèi)
人原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1322
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）組織來(lái)源于術(shù)后的結(jié)腸組織。
2)細(xì)胞鑒定：c-kit熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf原代 間質(zhì) 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
消化道 Cajal間質(zhì)細(xì)胞因分布于管壁的不同層面而被相應(yīng)命名，不同區(qū)域的Cajal間質(zhì)細(xì)胞有不同的結(jié)構(gòu)和功能。
Cajal間質(zhì)細(xì)胞以網(wǎng)絡(luò)狀分布在消化道腸神經(jīng)系統(tǒng)末梢與平滑肌細(xì)胞之間的一類(lèi)特殊細(xì)胞。腸道運(yùn)動(dòng)功能的產(chǎn)生和維持是Cajal間質(zhì)細(xì)胞、腸神經(jīng)系統(tǒng)以及平滑肌細(xì)胞三者協(xié)同作用的結(jié)果。間質(zhì)細(xì)胞不僅能自發(fā)產(chǎn)生節(jié)律性慢波，而且能介導(dǎo)腸神經(jīng)系統(tǒng)與平滑肌間的信號(hào)調(diào)節(jié)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠肉毒堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(CRAT)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠白細(xì)胞介素1受體拮抗劑(IL-1RA)elisa檢測(cè)試劑盒
Ca++Mg++ ——ATP酶測(cè)試盒
CASPASE-3蛋白共沉淀分析試劑盒
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雞白介素12(IL-12/70)elisa分析檢測(cè)試劑盒
6%蛋白電泳分離預(yù)制膠溶液
小鼠復(fù)制啟動(dòng)因子1(REPIN1)elisa檢測(cè)試劑盒
血小板活化因子受體抗體 PAFR/PAF Receptor
液泡蛋白分選受體SORCS2抗體 SORCS2
低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白3抗體 LRP3
短鏈脫氫酶/還原酶SDRO抗體 SDR-O
FITC標(biāo)記人CD35單克隆抗體 human CD35/FITC
FLYWCH2蛋白抗體 FLYWCH2
硫氧還蛋白5抗體 TXNDC5
球蛋白j鏈抗體 JCHAIN
4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框32抗體 C4orf32
8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框192抗體 C6orf192
即刻早期基因ARC抗體 ARC
鉀電壓閥門(mén)通道混合器相關(guān)亞家族成員7抗體 KCNA7
RAS互動(dòng)/干擾蛋白1抗體 RIN1
RPS27A抗體 RPS27A
死亡結(jié)構(gòu)域蛋白NRH2抗體 NRH2
糖原合酶激酶-3β單克隆抗體 [KO驗(yàn)證抗體] GSK-3 Beta
大鼠載脂蛋白C1(APOC1)elisa檢測(cè)試劑盒
人結(jié)腸間質(zhì)細(xì)胞Donkey Anti-Human IgG H&L / PE-Cy5
卵泡抑素相關(guān)蛋白5抗體
C15orf19; C18B11; C18B11 homolog; RNA pseudouridylate synthase domain containing 2; RNA pseudouridylate synthase domain containing protein 2; RNA pseudouridylate synthase domain-containing protein 2; RPUSD 2; RPUSD-2; RUSD2_HUMAN.
人結(jié)腸間質(zhì)細(xì)胞
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
人結(jié)直腸癌細(xì)胞；P53R (STR)
NCI-H226人肺鱗癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。