培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
結(jié)腸組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
上皮樣 多角形細(xì)胞
分類
人原代細(xì)胞
貨號
A01X1292
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）細(xì)胞來源于手術(shù)切除的正常結(jié)腸組織。
2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞角蛋白-18（CK-18）熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介：
結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸，在第 3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部，大部分固定于腹后壁，結(jié)腸的排列酷似英文字母M，將小腸包圍在內(nèi)。
結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：粘膜（上皮層，固有層，粘膜肌層），粘膜下層，肌層，外膜。其中上皮細(xì)胞主要位于粘膜層的上皮層，為單層柱狀上皮 ,含較多的杯狀細(xì)胞。結(jié)腸粘膜內(nèi)有杯狀細(xì)胞,可分泌堿性液體,保護(hù)結(jié)腸粘膜，潤滑大便，以助排便。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人并殖吸蟲抗體(IgM)elisa檢測試劑盒
LHX8蛋白抗體
LHX8
CROC4抗體
CROC4
糖血清蛋白（GSP）酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒
雞雌二醇(E2)elisa分析檢測試劑盒
蛋白電泳麗春紅染色試劑盒
小鼠甘露糖受體C1(MRC1)elisa檢測試劑盒
軸索過度生長抑制因子B受體抗體
Nogo B receptor
通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡA亞基1/TFIIA-α抗體
GTF2A1 alpha
磷酸化白細(xì)胞介素1受體銜接蛋白抗體 Anti-phospho-TIRAP(Tyr86)
磷酸化蛋白激酶樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶抗體 Anti-Phospho-PERK(Thr980)
穿孔素抗體 Anti-Perforin
細(xì)胞粘附分子伴侶蛋白2抗體 Anti-Sidekick 2
磷酸化心臟磷蛋白抗體
phospho-PLB (Thr17)
嗅覺受體5AR1抗體
OR5AR1
野生型P53誘導(dǎo)基因1抗體 Anti-WIG-1/PAG608
神經(jīng)元特異性蛋白家族成員2抗體 Anti-NSG2/HMP19
環(huán)指蛋白24抗體 Anti-RNF24
SH2結(jié)構(gòu)含磷酸肌醇SHIP1抗體 Anti-SHIP1
大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)elisa分析檢測試劑盒
人結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞Rabbit Anti-Monkey IgG H&L / Cy5
酸性核糖體磷蛋白P2抗體
BMPR-1A; Activin A receptor type II like kinase 3; Activin receptor like kinase 3; ACVRLK 3; ACVRLK3; ALK 3; ALK3; BMPR 1A; Bmpr; Bone morphogenetic protein receptor type IA; Bone morphogenetic protein receptor type IA precursor; BR 1a; BR1a; CD 292; CD292; CD292 antigen; EC 2.7.11.30; Serine threonine protein kinase receptor R5; Serine threonine protein kinase receptor R5 precursor; SKR 5; SKR5; zBMPR IA; zBMPRIA.
人結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞
人臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞
SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞；WI38/VA13 (STR)
NCI-H2291人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。