
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產品名稱
人類風濕關節(jié)炎滑膜成纖維細胞
產品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
關節(jié)滑膜組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
成纖維樣細胞
分類
人原代細胞
貨號
A01X1409
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)細胞來源于手術取得的患類風濕性關節(jié)炎病人的關節(jié)滑膜組織。
2)細胞鑒定:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:成纖維樣細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代成纖維細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
滑膜是關節(jié)囊的內層,淡紅色,平滑閃光,薄而柔潤,由疏松結締組織組成。關節(jié)腔內的所有結構,除關節(jié)軟骨、半月軟骨板以外 ,即便是通過關節(jié)腔的肌腱、韌帶等均全部為滑膜所包裹。
滑膜分泌滑液,在關節(jié)活動中起重要作用。正?;し譃閮蓪樱幢〉募毎麑?span lang="EN-US"> (內腔層)和血管層(內膜下層),是血管豐富的關節(jié)囊內膜,貼附于非關節(jié)面部分,覆蓋于關節(jié)囊內的骨面上,不在軟骨面上,此部分稱為邊緣區(qū)或裸區(qū)?;こ史奂t色,光滑發(fā)亮、濕而潤滑,有時可見絨毛,內含膠原性纖維。
滑膜細胞有 A、B兩型。巨噬細胞樣A型細胞,表面有絲狀偽足、漿膜內
公司正在出售的產品:
小鼠E-鈣粘附分子(E-Cadherin/CDH1/CD324)elisa檢測試劑盒
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磷酸化蛋白激酶C α/β2重組兔單克隆抗體 Phospho-PKC alpha (Thr638)
磷酸化接頭蛋白Gab 1抗體 Phospho-Gab1 (Tyr627)
胞粘蛋白2抗體 Cytohesin 2
補體因子B抗體 Factor B
線粒體鐵轉運蛋白2抗體 Mitoferrin 2/SLC25A28
心肌肌鈣蛋白抗體 Cardiac Troponin I/TNNC1
NUDT10蛋白抗體 NUDT10
Pacific Blue標記小鼠CD62L單克隆抗體 mouse CD62L/Pacific Blue
上皮粘連調控蛋白ESRP2抗體 ESRP2
神經細胞分化相關蛋白AHNAK抗體 AHNAK
核仁蛋白14抗體 Nucleolar protein 14
核轉錄因子SOX14抗體 SOX14
軸突導向因子SEMA3E抗體 Semaphorin 3E
轉運蛋白SEC24A抗體 SEC24A
大鼠骨鈣素(OT)elisa分析檢測試劑盒
人類風濕關節(jié)炎滑膜成纖維細胞Donkey Anti-Goat IgG H&L / PE-Cy3
鋅指蛋白909抗體
Blood group Rh(CE) polypeptide; Blood group RhCcEe antigen; CD240CE; CD240CE antigen; RH; Rh blood group antigen Evans; Rh blood group C antigen; Rh blood group, CcEe antigens; Rh polypeptide 1; Rh polypeptide I; RH30A; Rh4; RHC; RHCE blood group variant Crawford antigen Rh43; RHE; Rhesus blood group CE protein; Rhesus blood group E antigen; Rhesus blood group Rhce antigen; Rhesus blood group, CcEe antigens; Rhesus C/E antigens; Rhesus system C and E polypeptides; RhIVb(J); RHIXB; RHPI; RhVI; RhVIII; RHCE_HUMAN.
人類風濕關節(jié)炎滑膜成纖維細胞
人脾成纖維細胞
人食管癌細胞;TE-13 (STR)
NCI-H292人非小細胞肺癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。