
細胞簡介:

毛囊是包圍在毛發(fā)根部的囊狀組織,內(nèi)層是上皮組織性毛囊,外層是結(jié)締組織性毛囊,內(nèi)層與表皮相連,外層則與真皮相連。其中真皮主要由成纖維細胞構(gòu)成。
組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號 |
用途 |
頭皮組織 |
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
A01X1416 |
僅供科研研究實驗 |
細胞特性:
1)細胞來源于人頭皮組織。
2)細胞鑒定:波形蛋白 (Vimentin)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:長梭形細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf 原代 成纖維 細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)原代腸微血管內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)基。
實驗具體步驟:

(1)動物福利:小鼠麻醉犧牲/處死,或者斷頸處死;
(2)小鼠:可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min,然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈;
(3)取出心臟組織:用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔,取出心臟組織,置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中;
(4)組織:在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二,充分洗滌里邊的血液,/3次,每次5min;
(5)破碎組織:使用眼科鉗或者剪刀,將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊;(備注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min,
利于后期細胞從組織塊中爬出來,同時能夠消除部分結(jié)締組織等)
(6)種植組織塊:將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次,每次5min,然后使用完全培養(yǎng)基(含有1X雙抗)洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后,可以用細頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中(備注:破碎組織塊可能還含有液體,可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下,把液體);種植完成后,可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時,然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜(也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜);

(7)培養(yǎng)基培養(yǎng):將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基,然后在恒溫潮濕細胞培養(yǎng)箱(37℃,5% CO2)培養(yǎng)48h后觀察單個細胞從組織塊中爬出情況,一般3-5 day能夠達到傳代的爬出效率;
(8)貼壁細胞傳代:當單個細胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍,進行傳代,此時可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細胞,消化時間根據(jù)正常細胞消化時間即可,當然可以在消化過程中不斷管擦爬出細胞的皺縮情況,一旦達到消化完成(皺縮細胞≥70%)即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個細胞時候,一定要輕柔/緩慢,不能吹打到組織塊,如果組織塊掉下來,大概率是不會再貼壁成功啦。根據(jù)細胞數(shù)量種植到對應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中;
(9)鑒定:細胞在傳代至代、第五代、第十代時候可以將部分細胞進行鑒定,鑒定辦法包括:RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細胞術(shù)等。實驗方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。其中,機械分散法的特點是簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養(yǎng)后,細胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品:
P-PKCELISAKit
大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)elisa分析檢測試劑盒
NAG ELISA Kit
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BALPELISAKit
人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)elisa檢測試劑盒
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人白介素20(IL-20)elisa分析檢測試劑盒
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RNA酶抑制劑Rnasin 1KU
小鼠花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)elisa檢測試劑盒
丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)elisa分析檢測試劑盒
冰凍切片中性脂質(zhì)尼羅紅染色試劑盒
ATP合酶亞基O抗體
OSCP
CDK5和ABL1酶底物1抗體
CABLES1
DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅱ抗體 Anti-TOPO II/TOPO II Alpha
配對盒基因7抗體 Anti-PAX7
肝磷酸酯酶1抗體 Anti-PRL1/PTP4A1
絲氨酸/精氨酸相關(guān)核基質(zhì)蛋白2抗體 Anti-SRRM2
辣根過氧化物酶標記的小鼠抗羊IgG H&L
人毛囊成纖維細胞Rat IgG / AF750
G蛋白偶聯(lián)受體144抗體
C2orf31; DKFZP434E2135; Frizzled homolog 5; Frizzled-5; Frizzled5; Fz 5; Fz-5; Fz5; FZD 5; hFz5; FZD5; FZD5_HUMAN; FzE 5; FzE5; HFZ 5; HFZ5; MGC129692; Seven transmembrane receptor frizzled 5; Uncharacterized protein C2orf31; Wnt receptor.
人毛囊成纖維細胞
人膀胱平滑肌細胞
人晶體上皮細胞;SRA01/04
NCI-H446人小細胞肺癌細胞