培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人膀胱上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
膀胱組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
上皮樣 多角形細(xì)胞
分類
人原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1334
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）細(xì)胞來(lái)源于人正常膀胱組織。
2)細(xì)胞鑒定：廣譜角蛋白（PCK）熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf 原代上皮細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
膀胱是一個(gè)儲(chǔ)尿器官 ,它是由平滑肌組成的一個(gè)囊形結(jié)構(gòu)，位于骨盆內(nèi)，其后端開(kāi)口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌，可以控制尿液的排出。
膀胱壁分為三層：即漿膜層、肌肉層和粘膜層。膀胱上皮細(xì)胞主要出于粘膜層，是極薄的一層移行上皮組織，和輸尿管及尿道粘膜彼此連貫。粘膜在三角區(qū)由于緊密地和下層肌肉連合，所以非常光滑，但在其他區(qū)域則具有顯著的皺襞，在膀胱充盈時(shí)，皺襞即消失。粘膜層有腺組織，特別是在膀胱頸部及三角區(qū)。
由于尿路移形上皮會(huì)脫落，隨尿液一起排出，因此獲取相對(duì)比較容易，是泌尿組織工程的種子細(xì)胞。
公司正在出售的產(chǎn)品：
FGF19ELISAKit
大鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子激活物(HGFA)elisa分析檢測(cè)試劑盒
HGFA ELISA Kit
豚鼠鉤端螺旋體IgG(Leptospira)elisa分析檢測(cè)試劑盒
GuineapigLeptospiraIgGELISAKit
大鼠(SS)elisa檢測(cè)試劑盒
精（ARG）氧化高效液相色譜 （HPLC）分析試劑盒
維生素A含量測(cè)試盒
Pan-Ras鳥苷酸酶活性分析試劑盒
猴CD34分子(CD34)elisa分析檢測(cè)試劑盒
CD34 ELISA Kit
人多巴胺脫羧酶(DDC)elisa分析檢測(cè)試劑盒
DDCELISAKit
藍(lán)色熒光細(xì)胞核染色分析試劑盒
大鼠無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員3(WNT3)elisa檢測(cè)試劑盒
體外非細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞色素P450亞酶CYP2E1（MFC）活性
小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)elisa檢測(cè)試劑盒
腦蛋白239抗體
MPPED2
EI2BL/MRI1蛋白抗體
EI2BL/MRI1
酮基移換酶樣蛋白1抗體 Anti-TKTL1
磷酸化原癌基因蛋白激酶受體RET抗體 Anti-phospho-Ret/HSCR1(Tyr1062)
孤菲肽/痛敏肽抗體 Anti-Nociceptin
膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2抗體 Anti-SREBP-2
Cy5標(biāo)記的兔抗親和素
人膀胱上皮細(xì)胞人板層素相關(guān)多肽2亞型α(TMPO)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠垂草扁桃酸(VMA)elisa分析檢測(cè)試劑盒
Gal 8; Gal-8; Gal8; Galectin-8; LEG8_HUMAN; LGAL S8; LGALS8; PCTA 1; PCTA-1; PCTA1; Po66 carbohydrate binding protein; Po66 carbohydrate-binding protein; Po66 CBP; Po66-CBP; Prostate carcinoma tumor antigen 1.
人膀胱上皮細(xì)胞
人腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞
人惡性黑色素瘤細(xì)胞+EGFP；A375+EGFP
NCI-H661[h661]人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。