細胞簡介：
脾是重要的器官，有造血、濾血、衰老血細胞及參與反應(yīng)等功能。也是細胞遷移和接受抗原刺激后發(fā)生應(yīng)到、產(chǎn)生效應(yīng)分子的重要場所。
脾臟作為機體大的器官，占全身組織總量的 25%，含有大量的細胞和巨噬細胞，是機體細胞和體液的中心，通過多種機制發(fā)揮抗腫瘤作用. 脾臟切除導(dǎo)致細胞和體液功能的紊亂，影響腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。
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組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號 |
用途 |
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脾臟組織 |
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
A01X1453 |
僅供科研研究實驗 |
細胞特性：
1）細胞來源于人正常脾臟組織。
2)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
3)細胞生長方式：細胞是混合體系，少量貼壁生長，大部分懸浮生長。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 人原代脾外周血單個核細胞培養(yǎng)基 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
實驗具體步驟：
（1）動物福利：小鼠麻醉犧牲/處死，或者斷頸處死；
（2）小鼠：可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min，然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈；
（3）取出心臟組織：用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔，取出心臟組織，置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中；
（4）組織：在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二，充分洗滌里邊的血液，/3次，每次5min；
（5）破碎組織：使用眼科鉗或者剪刀，將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊；（備注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min，
利于后期細胞從組織塊中爬出來，同時能夠消除部分結(jié)締組織等）
（6）種植組織塊：將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次，每次5min，然后使用完全培養(yǎng)基（含有1X雙抗）洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后，可以用細頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中（備注：破碎組織塊可能還含有液體，可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下，把液體）；種植完成后，可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時，然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜（也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜）；
（7）培養(yǎng)基培養(yǎng)：將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基，然后在恒溫潮濕細胞培養(yǎng)箱（37℃，5% CO2）培養(yǎng)48h后觀察單個細胞從組織塊中爬出情況，一般3-5 day能夠達到傳代的爬出效率；
（8）貼壁細胞傳代：當(dāng)單個細胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍，進行傳代，此時可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細胞，消化時間根據(jù)正常細胞消化時間即可，當(dāng)然可以在消化過程中不斷管擦爬出細胞的皺縮情況，一旦達到消化完成（皺縮細胞≥70%）即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個細胞時候，一定要輕柔/緩慢，不能吹打到組織塊，如果組織塊掉下來，大概率是不會再貼壁成功啦。根據(jù)細胞數(shù)量種植到對應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中；
（9）鑒定：細胞在傳代至代、第五代、第十代時候可以將部分細胞進行鑒定，鑒定辦法包括：RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細胞術(shù)等。實驗方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。其中，機械分散法的特點是簡便、快速，但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差，適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人單胺氧化酶(MAO)elisa分析檢測試劑盒
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石蠟切片組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB完全間接檢測試劑盒
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甘油含量測試盒測定組織樣本 100T 微量酶標(biāo)法
神經(jīng)營養(yǎng)因子受體相互作用因子1抗體 Nrif1
食道癌相關(guān)基因抗體 SPINK7
NSUN5P2蛋白抗體 NSUN5P2
Pacific Blue標(biāo)記小鼠CD11b單克隆抗體 mouse CD11b/Pacific Blue
轉(zhuǎn)錄因子SOX5抗體 SOX5
組氨酸富含脯氨酸糖蛋白抗體 HPRG
核孔復(fù)合體蛋白抗體 NUP107
核有絲分裂器NuMA蛋白抗體 NUMA1
鋅指蛋白346抗體 ZNF346
鋅指蛋白72抗體 ZFP72
補體C1qα鏈多肽重組兔單克隆抗體 C1QA
成熟T細胞增殖蛋白1抗體 CMC4
DNA聚合酶γ/DNA pol γ抗體 POLG
ECT2L蛋白抗體 ECT2L
磷酸化紅細胞膜條帶4.1蛋白抗體 phospho-EPB41 (Tyr418 + Tyr660)
磷酸化-絲裂原活化蛋白激酶p38抗體（P-p38 MAPK） Phospho-P38 MAPK (Thr180 + Tyr182)
蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印印跡膜萘酚藍黑（NBB）染色試劑盒
人脾外周血單個核細胞人球蛋白G4（IgG4）elisa檢測試劑盒
大鼠甲狀旁腺(PTH)elisa檢測試劑盒
Dimethylaniline monooxygenase [N oxide forming] 5; Dimethylaniline monooxygenase [N-oxide-forming] 5; Dimethylaniline oxidase 5; FMO 5; FMO5; FMO5_HUMAN; Hepatic flavin containing monooxygenase 5; Hepatic flavin-containing monooxygenase 5.
人脾外周血單個核細胞
人毛囊成纖維細胞
人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細胞；HO-8910PM
NCI-N87+LUC人胃癌細胞熒光素酶標(biāo)記