
培養(yǎng)方法與步驟:
①動(dòng)物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí),待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人脾臟單核細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
脾臟。
生長特性
半懸浮培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
半懸浮培養(yǎng)。
分類
人原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1459
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1)細(xì)胞來源于脾臟。
2)細(xì)胞鑒定:CD14熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:半懸浮培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf原代 巨噬 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
脾是人體大的器官,分為白髓、邊緣區(qū)和紅髓。脾臟有造血、濾血、衰老血細(xì)胞及參與反應(yīng)等功能。也是細(xì)胞遷移和接受抗原刺激后發(fā)生應(yīng)到、產(chǎn)生效應(yīng)分子的重要場所。
單核細(xì)胞是機(jī)體防御系統(tǒng)的一個(gè)重要組成部分。與其它細(xì)胞比較,單核細(xì)胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶,并且具有更強(qiáng)的吞噬作用。它通過吞噬和產(chǎn)生抗體等方式來抵御和消滅入侵的病原微生物。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠可溶性CD105 sCD105 elisa檢測試劑盒
大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)elisa檢測試劑盒
小鼠抗透明帶抗體IgG(aZP-IgG)elisa檢測試劑盒
乳酸LD測試盒測全血 50管/48樣 比色法
組織胱硫醚-β-合成酶(Cystathionine-β-synthase;CBS)活性比色法定量檢測試劑盒
人肺表面活性蛋白D(SP-D)elisa分析檢測試劑盒
可溶性/酵母細(xì)胞膜蛋白(粗提)制備試劑盒
魚金屬硫蛋白2(MT-2)elisa分析檢測試劑盒
大鼠嗜酸性粒細(xì)胞過氧化物酶(EPO)elisa檢測試劑盒
FAHD1蛋白抗體 FAHD1
FAS凋亡抑制分子2抗體 FAIM2
磷酸化腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗體 phospho-ABCA1 (Ser2054)
磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體 Phospho-ATG4C (Ser398)
代謝型谷氨酸受體5B抗體 MGLUR5
蛋白激酶9抗體 PTK9
鋅指蛋白642抗體 ZNF642
鋅指蛋白BED4抗體 ZBED4
PE標(biāo)記人CD62E/CD62P單克隆抗體 human CD62E/CD62P/PE
PTCHD1蛋白抗體 PTCHD1
受體輔助蛋白1抗體 REEP1
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶Nek3抗體 NEK3
活化白細(xì)胞粘附分子抗體 CD166
肌肉細(xì)胞特異性泛素蛋白連接酶1抗體 MuRF1
組蛋白去甲基化酶JMJD5抗體 JMJD5
1號(hào)染色體開放閱讀框192抗體 C1orf192
細(xì)胞CYP1A2蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試劑盒
人脾臟單核細(xì)胞Goat IgM / RBITC
高爾基體膜蛋白抗體
Leukotriene A4 hydrolase LTA4; LTA4 hydrolase; LTA4H; LKHA4_HUMAN.
人脾臟單核細(xì)胞
人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;sh-sy5y轉(zhuǎn)染突變型
NCTC clone 929 [L cell, L-929]小鼠成纖維細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。