
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
乳腺組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
上皮樣 多角形細(xì)胞
分類
人原代細(xì)胞
貨號
A01X1370
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1)細(xì)胞來源于人正常乳腺組織。
2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞角蛋白(PCK)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,多角形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
乳腺導(dǎo)管位于胸部的皮下組織中,是的主要構(gòu)成組織之一,也是乳汁的排泄管道。乳腺管的主要功能是乳汁的排泄和儲存。每個乳腺葉都有一個輸乳管,輸乳管會在近處形成膨大的輸入管竇,末端變細(xì)并開口于。
乳腺被結(jié)締組織分隔為 15-25個 葉,每個葉又分為若干小葉,每個小葉是一個復(fù)管泡狀腺。
腺泡上皮為單層立方或柱狀,導(dǎo)管包括小葉內(nèi)導(dǎo)管、上間導(dǎo)管和總導(dǎo)管。小葉內(nèi)導(dǎo)管多為單層柱狀或立方上皮,小葉間導(dǎo)管為復(fù)層柱狀上皮,總導(dǎo)管又稱輸乳管,開口于,管壁為復(fù)層扁平上皮,下表皮相續(xù)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠多聚蛋白2(MMRN2)elisa檢測試劑盒
亞油酸(C18:2)含量試劑盒
牛乳體細(xì)胞分離試劑盒
豬磷酸甘油酸酯激酶2(PGK2)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測
大鼠血紅素氧合酶1(HO1)elisa檢測試劑盒
大鼠生長分化因子15(GDF15)elisa檢測試劑盒
亮(LEUCINE)氧化高效液相色譜 (HPLC)分析試劑盒
維生素B1含量測試盒
RhoB鳥苷酸酶活性分析試劑盒
皮質(zhì)素1抗體 Cortexin 1
鞘磷脂磷酸二酯酶4抗體 SMPD4
G蛋白偶聯(lián)受體115抗體 GPR115
G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子17抗體 RGS17
抑瘤素M受體抗體 OSMR
原鈣粘附蛋白20抗體 PCDH20
泛素載體蛋白R2抗體 CDC34B
呋喃他酮小鼠單抗 AMOZ
尾型源盒轉(zhuǎn)錄因子2重組兔單克隆抗體 CDX2
細(xì)胞分裂周期樣激酶3抗體 CLK3
SPOP蛋白抗體 SPOP
TRIM27蛋白抗體 TRIM27
AF680標(biāo)記的前列腺素E受體蛋白4抗體 EP4, Alexa Fluor 680 conjugated
AF750標(biāo)記的血管內(nèi)皮鈣粘蛋白抗體 CD144/VE Cadherin, Alexa Fluor 750 conjugated
緊密連接蛋白1抗體(C端) CLDN1
跨膜蛋白208抗體 TMEM208
大鼠甲狀腺素抗體(TAb)elisa檢測試劑盒
人乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞Rabbit Anti-FITC / FITC
糖脂轉(zhuǎn)移蛋白結(jié)構(gòu)域2抗體
tpr; TPR_HUMAN; translocated promoter region (to activated MET oncogene); TPR_HUMAN.
人乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞
人頸動脈平滑肌細(xì)胞
人卵巢癌細(xì)胞;IGR-OV1
NOZ人膽囊癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。