
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人小腸粘膜上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
小腸組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
上皮樣 多角形細(xì)胞
分類
人原代細(xì)胞
貨號
A01X1289
用途
僅供科研實驗
細(xì)胞特性:
1)細(xì)胞來源于人正常小腸組織。
2)細(xì)胞鑒定:廣譜角蛋白(PCK)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,多角形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。一般根據(jù)形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化將小腸分為三段,分別為十二指腸,空腸和回腸。
小腸壁結(jié)構(gòu)一般分 4層,由外向內(nèi)依次為:漿膜層,平滑肌層,粘膜下層和粘膜層。粘膜層又分為3層:靠近粘膜下層的是一層平滑肌,稱為粘膜肌層。其次為結(jié)締組織,又稱為固有層。后面向腸腔的是一層柱狀上皮細(xì)胞構(gòu)成的粘膜。
小腸粘膜有縱行和橫行皺襞,并有無數(shù)細(xì)小的指狀突起,稱為絨毛。絨毛的基底處粘膜內(nèi)陷成管狀,稱為利貝屈恩氏隱窩。隱窩基底部的上皮細(xì)胞不斷地進(jìn)行有絲分裂,
公司正在出售的產(chǎn)品:
RabbitOsteocalcinELISAkit
即早反應(yīng)蛋白3相互作用蛋白1抗體
IER3IP1
乳腺癌易感基因復(fù)合物亞基蛋白3抗體
BRCC3
石蠟切片組織IGF 蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
綿羊成纖維細(xì)胞生長因子23(FGF23)elisa檢測試劑盒
蛋白上樣緩沖液非還原,5× 10ml
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)elisa檢測試劑盒
賴氨酸甲基化抗體
Methylated Lysine (di methyl , mono methyl )
脫氧核糖核酸酶2B抗體
DNASE2B
B細(xì)胞基因1抗體 Anti-TLE4
維甲酸誘導(dǎo)蛋白3抗體 Anti-RAI3
神經(jīng)肽Y抗體 Anti-NPY/Neuropeptide Y
血管擴(kuò)張刺激磷蛋白抗體 Anti-VASP
腫瘤蛋白D53抗體
TPD52L1
線粒體核糖體蛋白L42抗體
MRPL42
紡錘體組裝異常蛋白6抗體 Anti-SASS6
緊密連接蛋白/小分子膠原蛋白OCEL1抗體 Anti-OCEL1
重組葡萄球菌蛋白A抗體 Anti-Protein A
擴(kuò)張型心肌病蛋白1G抗體 Anti-Titin/CMD1G
親和純化小鼠IgG
人小腸粘膜上皮細(xì)胞雞層連蛋白/板層素(LN)elisa分析檢測試劑盒
麥黃酮蛋白電泳考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒
Gamma glutamyl transpeptidase related enzyme; Gamma glutamyltranspeptidase 5; Gamma-glutamyl transpeptidase-related enzyme; Gamma-glutamyltransferase 5 heavy chain; Gamma-glutamyltransferase-like activity 1; Gamma-glutamyltranspeptidase 5; GGT 5; GGT REL; GGT-rel; GGT5; GGT5_HUMAN; DKFZP566O011; GGTLA1; Glutathione hydrolase 5; Leukotriene-C4 hydrolase; Gamma-glutamyltransferase 5 heavy chain.
人小腸粘膜上皮細(xì)胞
人冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞
人肺癌細(xì)胞;NCI-H3255
PATU8988t(PATU8988)人胰腺癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。