
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人胰腺癌細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
手術(shù)胰腺癌組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
鋪路石狀細(xì)胞
分類
人原代細(xì)胞
貨號
A01X1358
用途
僅供科研實驗
細(xì)胞特性:
1)細(xì)胞來源于人手術(shù)胰腺癌組織。
2)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
3)細(xì)胞生長方式:鋪路石狀細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
胰腺癌是一種惡性程度很高,診斷和都很困難的惡性腫瘤。大多起源于腺管上皮的導(dǎo)管腺癌。
公司正在出售的產(chǎn)品:
通用型線粒體DNA片段常見缺失(CD4977)定量擴增分析試劑盒
小鼠尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶(NNMT)elisa檢測試劑盒
大鼠封閉蛋白5(CLDN5)elisa檢測試劑盒
羧酸酯酶(carboxylesterase)活性比色法定量檢測試劑盒
人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)elisa分析檢測試劑盒
通用型禽腦脊髓炎(Avian Encephalomyelitis;AE)
尼氏染色試劑盒(甲基紫法)2×50ml
大鼠髓過氧化物酶(MPO)elisa檢測試劑盒免費代測
組織因子(TISSUE FACTOR)活性熒光定量檢測試劑盒
ATP合酶亞基O抗體 OSCP
Biotin標(biāo)記人CD13單克隆抗體 human CD13/Biotin
跨膜蛋白TMED4抗體 TMED4
類固醇5α還原酶1抗體 SRD5A1
ZNFN1A2蛋白抗體 ZNFN1A2
β-抑制蛋白2抗體/β休止蛋白2/β-arrestin抗體 Beta arrestin 2
細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白抗體 SM22 Alpha
細(xì)胞色素C氧化酶蛋白6A2抗體 COX6A2
KIAA1429蛋白抗體 KIAA1429
LSM6蛋白抗體 LSM6
缺陷性分配源物β抗體 PARD6B
人類皰疹病毒8 ORF62抗體 HHV8 ORF62
肝素結(jié)合性表皮生長因子抗體 HBEGF
高遷移率族蛋白B4抗體 HMGB4
粘蛋白6單克隆抗體 MUC6
腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白8樣蛋白3/TNFα-IP 8L3抗體 TNFAIP8L3
犬Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)elisa分析檢測試劑盒
人胰腺癌細(xì)胞Mink IgG
轉(zhuǎn)錄因子HELT蛋白抗體
HBK 2; HBK2; Human brain potassium channel 2; KCNA 6; Kcna6; KCNA6_HUMAN; KV1.6; potassium voltage gated channel shaker related subfamily member 6; potassium voltage gated channel subfamily A member 6; Potassium voltage-gated channel subfamily A member 6; voltage gated potassium channel protein Kv1.6; Voltage gated potassium channel subunit Kv1.6; Voltage-gated potassium channel HBK2; Voltage-gated potassium channel subunit Kv1.6.
人胰腺癌細(xì)胞
人宮頸平滑肌細(xì)胞
KATO III 人胃腺癌細(xì)胞(低分化
pc-9人肺癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。