細(xì)胞簡介：
癌組織由實質(zhì)和間質(zhì)兩部分構(gòu)成，癌細(xì)胞構(gòu)成癌實質(zhì)，是癌的主要成分，具有組織來源特異性，癌間質(zhì)一般由結(jié)締組織和血管組成，起支持和營養(yǎng)癌實質(zhì)的作用，不具有特異性。
當(dāng)實體瘤超過 1-2mm時，需要通過新生的血管和活化的癌相關(guān)成纖維細(xì)胞來獲取癌細(xì)胞生長和增殖所必須的營養(yǎng)物質(zhì)。其中，癌相關(guān)成纖維細(xì)胞可通過分泌多種細(xì)胞因子和生長因子來發(fā)揮促進(jìn)癌血管**的作用。
上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（ EMT）是一種胚胎發(fā)育期的表型轉(zhuǎn)化，在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中也能觀察到相似的EMT過程。而由上皮和間質(zhì)相互作用所形成的腫瘤-宿主界面微環(huán)境的平衡狀態(tài)直
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組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號 |
用途 |
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手術(shù)胰腺癌組織 |
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
A01X1359 |
僅供科研研究實驗 |
細(xì)胞特性：
1）細(xì)胞來源于人手術(shù)胰腺癌組織。
2）細(xì)胞鑒定：波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽性。
3）經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5）細(xì)胞生長方式：長梭形，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf 原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
實驗具體步驟：
（1）動物福利：小鼠麻醉犧牲/處死，或者斷頸處死；
（2）小鼠：可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min，然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈；
（3）取出心臟組織：用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔，取出心臟組織，置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中；
（4）組織：在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二，充分洗滌里邊的血液，/3次，每次5min；
（5）破碎組織：使用眼科鉗或者剪刀，將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊；（備注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min，
利于后期細(xì)胞從組織塊中爬出來，同時能夠消除部分結(jié)締組織等）
（6）種植組織塊：將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次，每次5min，然后使用完全培養(yǎng)基（含有1X雙抗）洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后，可以用細(xì)頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中（備注：破碎組織塊可能還含有液體，可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下，把液體）；種植完成后，可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時，然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜（也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜）；
（7）培養(yǎng)基培養(yǎng)：將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基，然后在恒溫潮濕細(xì)胞培養(yǎng)箱（37℃，5% CO2）培養(yǎng)48h后觀察單個細(xì)胞從組織塊中爬出情況，一般3-5 day能夠達(dá)到傳代的爬出效率；
（8）貼壁細(xì)胞傳代：當(dāng)單個細(xì)胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍，進(jìn)行傳代，此時可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細(xì)胞，消化時間根據(jù)正常細(xì)胞消化時間即可，當(dāng)然可以在消化過程中不斷管擦爬出細(xì)胞的皺縮情況，一旦達(dá)到消化完成（皺縮細(xì)胞≥70%）即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個細(xì)胞時候，一定要輕柔/緩慢，不能吹打到組織塊，如果組織塊掉下來，大概率是不會再貼壁成功啦。根據(jù)細(xì)胞數(shù)量種植到對應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中；
（9）鑒定：細(xì)胞在傳代至代、第五代、第十代時候可以將部分細(xì)胞進(jìn)行鑒定，鑒定辦法包括：RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細(xì)胞術(shù)等。實驗方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。其中，機(jī)械分散法的特點(diǎn)是簡便、快速，但對組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差，適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品：
PYYELISAkit
干擾素α1b抗體
IFN alpha
鋅指蛋白851抗體
BTBD15
轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品35S基因檢測試劑盒
尼氏染色試劑盒(亞甲藍(lán)法)3×50ml
大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)elisa檢測試劑盒
組織因子（TISSUE FACTOR）活性比色法定量檢測試劑盒
甲基化樣蛋白8抗體
METTL8
細(xì)胞質(zhì)分裂付出蛋白5抗體
DOCK5
微管蛋白β4抗體 Anti-TUBB4/beta IV Tubulin
松弛素3抗體 Anti-Relaxin 3
胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體 Anti-Nanog
VAMP1囊泡相關(guān)膜蛋白1抗體 Anti-VAMP1/Synaptobrevin-1
腫瘤/睪丸抗原44抗體
TPTE
線粒體核糖體蛋白L46抗體
MRPL46
血清應(yīng)答因子結(jié)合蛋白1抗體 Anti-SRFBP1
O位N-乙酰葡萄糖胺OGT抗體 Anti-OGT/O-GlcNAc transferase
前列腺素E2受體2抗體 Anti-Prostaglandin E Receptor EP2
轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2抗體 Anti-TFR2/Transferrin Receptor 2
水IgG（親和純化)
人胰腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞Rat NAD(P)H dehydrogenase[quinone]1(NQO1)ELISA kit
人骨成型蛋白2(BMP-2)elisa分析檢測試劑盒
HOM TES 87; LIS1 interacting protein NUDE1 rat homolog; LIS1 interacting protein NUDE1; LIS4; NDE 1; NDE1; NDE-1; NDE1_HUMAN; Nuclear distribution gene E homolog 1; Nuclear distribution protein nudE homolog 1; NUDE 1; NudE; NudE nuclear distribution gene E homolog 1 (A. nidulans); NudE nuclear distribution gene E homolog 1; NUDE1.
人胰腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞
人宮頸成纖維細(xì)胞
NCI-N87+LUC人胃癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記
PIEC豬髖動脈內(nèi)皮細(xì)胞