產(chǎn)品名稱
兔結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
結(jié)腸組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
鋪路石狀細(xì)胞
分類
兔原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X2055
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常結(jié)腸組織。
2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞角蛋白-18（CK-18）熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 上皮 細(xì) 胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸，在第 3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部，大部分固定于腹后壁，結(jié)腸的排列酷似英文字母M，將小腸包圍在內(nèi)。
結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：粘膜（上皮層，固有層，粘膜肌層），粘膜下層，肌層，外膜。結(jié)腸黏膜上皮在環(huán)境或遺傳等多種致癌因素作用下導(dǎo)致結(jié)腸癌，是常見的惡性腫瘤之一。因此，體外培養(yǎng)結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞為研究進(jìn)一步結(jié)腸癌等提供了前提和基礎(chǔ)。
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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βA3/A1-crystallin蛋白抗體
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乳腺癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗體 Anti-RAD51C
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶Nek3抗體 Anti-NEK3
鋅指蛋白23抗體 Anti-ZNF23
SKT蛋白抗體
SKT
中心體蛋白110抗體
CP110
突觸相關(guān)蛋白29抗體 Anti-SNAP29
過(guò)氧化酶活化受體γ2抗體 Anti-PPAR gamma 2
絲裂原活化蛋白激酶p38α抗體 Anti-p38MAPK/MAPK14/p38Alpha
磷酸化羥化酶抗體 Anti-Phospho-TH (Ser31)
兔抗狗IgG H&L抗血清
兔結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞Rabbit Anti-Mink IgG H&L / Cy7
腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常源蛋白抗體
APEX1_HUMAN; DNA-(apurinic or apyrimidinic site) endonuclease; EC:3.1.11.2; APE; APE1; APEX; APX; HAP1; REF1; APEX nuclease (APEN); Apurinic-apyrimidinic endonuclease 1 (AP endonuclease 1; APE-1); REF-1; Redox factor-1; DNA-(apurinic or apyrimidinic site) endonuclease, mitochondrial;
兔結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞
人Treg細(xì)胞
DoTc2-4510人宮頸癌細(xì)胞
SK-HEP-1人肝癌細(xì)胞