
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔輸卵管平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
輸卵管組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
梭形細(xì)胞
分類
兔原代細(xì)胞
貨號
A01X2119
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常輸卵管組織。
2)細(xì)胞鑒定:平滑肌肌動蛋白(α-SMA)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 平滑肌 細(xì) 胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
輸卵管是卵子運(yùn)輸、儲存、獲能,以及卵母細(xì)胞采取、運(yùn)送、成熟、受精和早期胚胎發(fā)育的重要場所。輸卵管與其他空腔器官相似,其管壁由內(nèi)向外為粘膜層 (tunica mucosa)、肌層(muscular layer)和漿膜層所構(gòu)成。其中,肌層的結(jié)構(gòu)和厚度因不同節(jié)段而有差異,峽部肌層厚,管腔亦小。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)elisa檢測試劑盒
毛發(fā)角蛋白34抗體
KRT34
巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白7抗體
BBS7
人前白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液
人α-內(nèi)肽(α-EP)elisa分析檢測試劑盒
大鼠白介素2(IL-2)elisa檢測試劑盒
小鼠通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡH肽1(GTF2H1)elisa檢測試劑盒
Neuromedin-C抗體
Neuromedin-C
7號染色體開放閱讀框26抗體
C7orf26
促甲狀腺素受體抗體(N端) Anti-TSHR (NT)
血小板活化因子受體抗體 Anti-PAFR/PTAFR
陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)器1抗體 Anti-OCT1
微管卷曲蛋白SYNC抗體 Anti-SYNC/Syncoilin
脊髓性肌癥蛋白SMA抗體
Gemin 3
DNAJC18蛋白抗體
DNAJC18
囊泡相關(guān)膜蛋白3抗體 Anti-VAMP3/Cellubrevin
NDST1蛋白抗體 Anti-NDST1
基因蛋白4抗體 Anti-REG4/RELP
G蛋白偶聯(lián)誘導(dǎo)蛋白2受體抗體 Anti-TRIB1/GIG2
大鼠白介素35(IL-35)elisa分析檢測試劑盒
兔輸卵管平滑肌細(xì)胞大鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)elisa分析檢測試劑盒
細(xì)胞鎂離子濃度酶反應(yīng)光譜法定量檢測試劑盒
CADH9_HUMAN; Cadherin 9 type 2; Cadherin-9; Cadherin9; CDH 9; CDH9; T1 cadherin.
兔輸卵管平滑肌細(xì)胞
大鼠嗅球神經(jīng)干細(xì)胞
小鼠氣道平滑肌細(xì)胞;ASMC (種屬鑒定)
SW780人膀胱移行細(xì)胞癌
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。