
培養(yǎng)方法與步驟:
①動(dòng)物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開(kāi)腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí),待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀(guān)察:細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁,并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好,可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色,此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞,這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱(chēng)
兔小腸成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
小腸組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
長(zhǎng)梭狀細(xì)胞
分類(lèi)
兔原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X2054
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常小腸組織。
2)細(xì)胞鑒定:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:長(zhǎng)梭狀細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 成纖維 細(xì) 胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小腸位于腹中,上端接幽門(mén)與胃相通,下端通過(guò)闌門(mén)與大腸相連。小腸與心互為表里。是食物消化吸收的主要場(chǎng)所,盤(pán)曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門(mén),下接盲腸,全長(zhǎng)約 5-6米,張開(kāi)有半個(gè)籃球大,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。其管壁外圍有結(jié)締組織,這些結(jié)締組織由成纖維細(xì)胞構(gòu)成,對(duì)小腸起到支持和保護(hù)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)elisa分析檢測(cè)試劑盒
LSM14A蛋白抗體
LSM14A/C19orf13
細(xì)胞色素P450 2W1抗體
CYP2W1
冰凍切片過(guò)氧化酶活性(混合型)染色試劑盒
人白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠補(bǔ)體C5a(C5a)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)elisa檢測(cè)試劑盒
ORC5L蛋白抗體
ORC5L
鹵酸脫鹵酶樣水解酶域內(nèi)含蛋白1A抗體
HDHD1A
金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體(N端) Anti-TIMP-1(NT)
血小板源性生長(zhǎng)因子受體A抗體(PDGFRα) Anti-PDGFRA
磷酸化酶β抗體 Anti-PHKB
溶質(zhì)載體家族蛋白22成員5抗體 Anti-Slc22a5
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶ICK抗體
phospho-ICK (Tyr159)
嗅覺(jué)受體5T3抗體
OR5T3
鋅指蛋白340抗體 Anti-ZBTB46/ZNF340/BTBD4
N-乙酰轉(zhuǎn)移酶8B抗體 Anti-NAT8B
環(huán)指蛋白133抗體 Anti-RNF133
L選擇素抗體 Anti-L-Selectin/CD62L
大鼠P物質(zhì)(SP)elisa分析檢測(cè)試劑盒
兔小腸成纖維細(xì)胞細(xì)胞胰腺脂酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
小鼠血小板反應(yīng)蛋白3(THBS3)elisa檢測(cè)試劑盒
HERV-W_7q21.2 provirus ancestral Env polyprotein; Endogenous retrovirus group W member 1; env; Env-W; Envelope polyprotein gPr73; Enverin; ENW1_HUMAN; ERVW; ERVW-1; Gp24; Gp50; HERV-7q Envelope protein; HERV-W envelope protein; HERVW; SU; Syncytin 1; Syncytin; Syncytin-1; TM; Transmembrane protein; Surface protein.
兔小腸成纖維細(xì)胞
大鼠心室心肌細(xì)胞
小鼠神經(jīng)元細(xì)胞;NSC34
TCCSUP人膀胱癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無(wú)菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。