培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱(chēng)
兔心室心肌細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
心臟組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
柱狀細(xì)胞
分類(lèi)
兔原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X2020
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常心臟組織。本細(xì)胞為終末分化細(xì)胞，增殖能力很弱，建議客戶(hù)收到細(xì)胞后直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)，不要進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)。
2)細(xì)胞鑒定：肌球蛋白重鏈(Myosin heavy chain)熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：柱狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代心肌細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
心臟壁主要由心肌構(gòu)成，心室壁比心房壁厚，其中，左心室比右心室壁厚，在心臟的四個(gè)腔中，左心室的心肌。心肌的工作細(xì)胞包括心房肌和心室肌。心肌細(xì)胞為短柱狀，一般只有一個(gè)細(xì)胞核，心肌細(xì)胞之間有閏盤(pán)結(jié)構(gòu)。心房與心室的心肌層不直接相連，它們分別起止于心房和心室交界處的纖維支架，形成各自獨(dú)立的肌性壁，從而保證心房和心室各自進(jìn)行獨(dú)立的收縮舒張，以推動(dòng)血液在心臟內(nèi)的定向流動(dòng)。臨床研究表明，心肌病是一組異質(zhì)性心肌，表現(xiàn)為心室不適當(dāng)?shù)姆屎窕驍U(kuò)張，可引起心血管性死亡或進(jìn)展性心力衰竭。
公司正在出售的產(chǎn)品：
/酵母堿性焦磷酸酶（Alkaline Pyrophosphatase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞CREB蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒
依諾沙星殘留ELISA測(cè)試盒（殘留）
通用型ECL化學(xué)發(fā)光顯影試劑盒
小鼠二氫硫辛酸脫氫酶(DLD)elisa檢測(cè)試劑盒
組織短鏈脂酰脫氫酶（ACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
人白介素2elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠氧化型低密度脂蛋白（OxLDL）elisa檢測(cè)試劑盒
磷酸化轉(zhuǎn)錄因子3抗體 phospho-TCF3 (Ser39)
硫酸乙酰肝素蛋白多糖2抗體 HSPG2/Heparan Sulfate Proteoglycan 2
ENAH蛋白抗體 ENAH
FAM195B蛋白抗體 FAM195B
鋅指蛋白913抗體 zbtb11
胸腺素抗體 Thymulin
促黃體**素受體抗體 LHR
蛋氨酸合成酶MTR抗體 MTR
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶ICK抗體 ICK
絲裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白2抗體 JIP2
PE標(biāo)記大鼠CD8a單克隆抗體 Rat CD8a/PE
PE標(biāo)記小鼠FOXP3單克隆抗體 Mouse FOXP3/PE
14-3-3 Theta重組兔單克隆抗體 14-3-3 Theta
1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框31抗體 C1orf31
環(huán)指蛋白207抗體 RNF207
雞白痢、雞傷寒菌抗體 Salmonella gallinarum
小鼠5羥色胺受體2A(5-HTR 2A)elisa檢測(cè)試劑盒
兔心室心肌細(xì)胞Rabbit Anti-Guinea Pig IgM / AP
肉瘤抗原1抗體
Candidate of metastasis 1; COM1; Nuclear protein 1; NUPR1; NUPR1_HUMAN; p8 protein; Protein p8.
兔心室心肌細(xì)胞
大鼠心房心肌細(xì)胞
小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌（OSCC）細(xì)胞系；moc1
THLE-2人正常肝細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。