
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
鴨肝間質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
肝組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
長梭形
分類
鴨原代細(xì)胞
貨號
A01X2315
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1) 組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常肝組織。
2) 細(xì)胞鑒定:CD44熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長方式:長梭形,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF原代 間質(zhì) 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
肝臟是人體中大的腺體,也是大的實(shí)質(zhì)性臟器。肝間質(zhì)細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞,已有研究發(fā)現(xiàn)它可以向骨、軟骨、肌腱、脂肪、等分化。成體干細(xì)胞的向肌細(xì)胞的分化使得很多肌肉退行性、遺傳性的多了一種更佳的選擇。
公司正在出售的產(chǎn)品:
組織單胺氧化酶B型(MAO-B)活性熒光定量檢測試劑盒
αSMA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒
無內(nèi)質(zhì)粒小提試劑盒 50次
化妝品環(huán)(cyclamate)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒
小鼠補(bǔ)體因子H(CFH)elisa檢測試劑盒
大鼠凝血酶/抗凝血酶復(fù)合體(TAT)elisa檢測試劑盒
石蠟切片組織衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位間接染色試劑盒
兔白介素-5(IL-5)elisa分析檢測試劑盒
通用型(folic acid)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒
血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移蛋白抗體 AAMP
衍生透明質(zhì)酸相關(guān)蛋白抗體 ITIH1
蛋白酶體組裝分子伴侶3抗體 PSMG3
凋亡相關(guān)蛋白4抗體 [KO驗(yàn)證抗體] PDCD4
FDXACB1蛋白抗體 FDXACB1
FITC標(biāo)記小鼠CD54/ICAM-1單克隆抗體 mouse CD54/ICAM-1/FITC
磷脂酰肌醇激酶p85β抗體 PIK3R2
毛發(fā)角蛋白34抗體 KRT34
2型補(bǔ)體受體(CD21)抗體 CR2
6號染色體開放閱讀框182抗體 C6ORF182
基質(zhì)金屬蛋白酶-24抗體 MMP24
甲/2-(甲基氨基)-1-苯基-1-丙酮單克隆抗體 Methcathinone
Ran結(jié)合蛋白11抗體 IPO11
Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體 ROCK2
絲氨酸羧肽酶1抗體 Serine carboxypeptidase 1
通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡA亞基1/TFIIA-β抗體 GTF2A1 beta
豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)elisa檢測試劑盒
鴨肝間質(zhì)細(xì)胞Rabbit Anti-Chicken IgG H&L / Cy3
核酸內(nèi)切酶G樣蛋白1抗體
CaMK2 beta+gamma+delta; CaMK2 beta; CaMK2 gamma; CaMK2 delta; CAMK2G; Calcium/calmodulin dependent protein kinase (CaM kinase) II beta; Calcium/calmodulin dependent protein kinase II beta; Calcium/calmodulin dependent protein kinase IIB; Calcium/calmodulin dependent protein kinase type II beta chain; CAM 2; CaM kinase II beta chain; CaM kinase II beta subunit; CAM2; CAMK 2; CAMK 2B; CaMK II beta subunit; CaMK II subunit beta; CAMK2; CaMK2 beta; CAMK2B; CAMKB; CaMKII beta subunit; CaMKIIB; MGC29528; Proline rich calmodulin dependent protein kinase; CaM kinase II; Calcium/calmodulin-dependent protein; CaM kinase II gamma subunit; CaM-kinase II gamma chain; CaM kinase II delta subunit; CaM-kinase II delta chain; CAM2; CAMK; CAMK-II; CAMK2D; CAMK2G; CAMK2N2; CAMKD; CAMKG; KCC2B; kinase CaMK2-beta.
鴨肝間質(zhì)細(xì)胞
大鼠骨髓單核細(xì)胞
LUDLU-1人肺鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;sh-sy5y轉(zhuǎn)染突變型
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。