
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
羊卵巢顆粒細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
卵巢組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
不規(guī)則細胞
分類
羊原代細胞
貨號
A01X2295
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1) 組織來源于實驗動物的正常卵巢組織。
2) 細胞鑒定:卵泡刺受體(FSHR)熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細胞生長方式:不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 顆粒 細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
卵巢是雌性動物的生殖器官。卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇。它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成;髓質(zhì)位于中央,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,其中有許多血管、管和神經(jīng)。
卵巢是分泌雌的主要器官。卵巢分泌的雌主要是雌二醇。卵巢中顆粒細胞是合成雌的場所。其產(chǎn)生過程是使雄烯二酮轉(zhuǎn)變成雌:內(nèi)膜細胞在LH的作用下,使膽固醇轉(zhuǎn)變?yōu)樾巯┒?;顆粒細胞在FSH的作用,發(fā)育過程中產(chǎn)生芳香化酶,它使雄烯二酮轉(zhuǎn)變成雌。形成的雌分泌到卵泡液和血液中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
CETPELISAKit
甲狀腺素(T4)elisa分析檢測試劑盒
Sea Lion Thyroxine(T4)ELISA kit
人膽堿轉(zhuǎn)運體樣蛋白4(SLC44A4)elisa分析檢測試劑盒
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磷酸化腦質(zhì)膜單胺轉(zhuǎn)運蛋白PMAT抗體 Anti-phospho-SLC29A4(Tyr198)
視黃酸受體應(yīng)答蛋白2抗體 Anti-TIG2
中心體相關(guān)蛋白激酶Nek2抗體 Anti-NEK2
鋅指蛋白749抗體 Anti-ZNF749
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細胞分裂周期相關(guān)蛋白3抗體
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RIPA裂解液(蛋白裂解液)100ml
載玻片細胞RUNX3蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
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環(huán)指蛋白167抗體
RNF167
驅(qū)動蛋白家族成員26B抗體
KIF26B
固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白裂解激活蛋白抗體 Anti-SCAP/SREBF chaperone protein
磷酸化磷脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)抗體 Anti-phospho-PI3 Kinase p110 beta(Ser1070)
組蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶5抗體 Anti-PRMT5
泛素蛋白連接酶U抗體 Anti-UBE2U
膠體金標(biāo)記的兔抗馬IgG H&L
羊卵巢顆粒細胞通用型野油菜黃單胞菌菜豆疫病致病變種(Xanthomonas campestris pv.pelargonii;Xcp)基因檢測試劑盒
/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性高質(zhì)敏感比色法定量檢測試劑盒
A2AP; A2AP_HUMAN; AAP; Alpha 2 antiplasmin; Alpha 2 antiplasmin pigment epithelium derived factor; Alpha 2 AP; ALPHA 2 PI; Alpha 2 plasmin inhibitor; Alpha 2 plasmin inhibitor deficiency; Alpha-2-antiplasmin; Alpha-2-AP; Alpha-2-PI; Alpha-2-plasmin inhibitor; Antiplasmin deficiency; API; Plasmin inhibitor deficiency; PLI; Serine (or cysteine) peptidase inhibitor, clade F, member 2; Serine (Or cysteine) peptidase inhibitor, clade F, member 2, isoform CRA_c; Serine (or cysteine) proteinase inhibitor, clade F (alpha 2 antiplasmin pigment epithelium derived factor) member 2; Serine (Or cysteine) proteinase inhibitor, clade F, member 2; Serine or cysteine peptidase inhibitor clade F member 2; Serpin F2; Serpin peptidase inhibitor clade F; Serpin peptidase inhibitor, clade F (alpha 2 antiplasmin pigment epithelium derived factor) member 2; SERPINF2.
羊卵巢顆粒細胞
大鼠膈肌細胞
MOLM-14人急性髓系白血病細胞
人小腸上皮細胞;FHs74Int
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。