
培養(yǎng)方法與步驟:
①動(dòng)物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開(kāi)腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí),待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁,并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好,可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色,此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞,這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱(chēng)
狗腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
小腸組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
上皮樣 多角形細(xì)胞
分類(lèi)
狗原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X2310
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1) 組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常小腸組織。
2) 細(xì)胞鑒定:vWF熒光染色為陽(yáng)性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,多角形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代 內(nèi)皮 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小腸位于腹中,上端接 幽門(mén) 與胃相通,下端通過(guò)闌門(mén)與大腸相連。小腸與心互為表里。是食物消化吸收的主要場(chǎng)所,盤(pán)曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門(mén),下接
盲腸 ,全長(zhǎng)約5-6米,張開(kāi)有半個(gè)籃球大,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。
微血管內(nèi)皮細(xì)胞呈單層覆蓋于微血管表面,構(gòu)成血管內(nèi)外物質(zhì)交換的一種重要屏障,是循環(huán)血流動(dòng)力和血液中危險(xiǎn)因素的主要靶點(diǎn)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Mousec-junELISAKit
艾滋病病毒EP1抗體
HIVEP1
芳香乙酰胺脫乙?;笜拥鞍?span>4抗體
AADACL4
人CD34分子(CD34)elisa分析檢測(cè)試劑盒
體液基質(zhì)金屬(MMP-9)捕獲檢測(cè)試劑盒
小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠骨橋素(OPN)elisa檢測(cè)試劑盒
MAF1蛋白抗體
MAF1
12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框54抗體
C12ORF54
神經(jīng)元電壓門(mén)控鈉通道蛋白β2/Na+ CP type IIβ抗體 Anti-SCN2B
視網(wǎng)膜色素變性蛋白1抗體 Anti-RP1/DCDC4A
神經(jīng)囊泡膜蛋白1抗體 Anti-NRSN1
X射線(xiàn)修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白抗體 Anti-XRCC1
硫酸酯酶修飾因子1抗體
SUMF1
腫瘤/睪丸抗原47B1抗體
CT47B1
跨膜蛋白SEMA4D抗體 Anti-SEMA4D/CD100
芳香酯酶1(對(duì)氧磷酶)抗體 Anti-PON1
P選擇素抗體 Anti-P-selectin/CD62p
腫瘤細(xì)胞調(diào)亡素/死亡受體5抗體 Anti-TRAILR2/DR5/CD262
PE標(biāo)記雞IgM
狗腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞兔白蛋白(Albumin)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠凝血因子Ⅶ(F7)elisa檢測(cè)試劑盒
Fbx32; 4833442G10Rik; AI430017; Atrogin 1; Atrogin-1; ATROGIN1; Atrophy gene 1; F box only protein 32; F-box only protein 32; F-box protein 32; FBX32_HUMAN; fbxo25; FBXO32; FLJ32424; MAFbx; MGC108443; MGC137646; MGC33610; Muscle atrophy F box; Muscle atrophy F box protein; Muscle atrophy F-box protein.
狗腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞
大鼠表皮干細(xì)胞
NCI-H2009人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌(OSCC)細(xì)胞系;moc1
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無(wú)菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。